Logo-mj
مجله پزشکی دانشگاه علوم پزشکی تبریز. 1396؛39(6): 74-80.
  تعداد مشاهده چکیده: 1424
  تعداد دانلود PDF: 254

مقاله پژوهشی

روشی ساده برای تخلیص ساب کلاس IgG2a موشی با کمک کروماتوگرافی تعویض یونی و افینیتی کروماتوگرافی

زهرا مرادی نبرین 1، جعفر مجیدی 2*، لیلی عاقبتی ملکی 2، توحید کاظمی 2، جلال عبدالعلی زاده 3، سمیه داداشی 2، صادق عیوضی 2، مجید احمدی 2، نعیمه مجیدی ذوالبنین 4

1 شعبه ارس دانشگاه علوم پزشکی تبریز، تبریز، ایران
2 گروه ایمونولوژی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تبریز، تبریز، ایران
3 آزمایشگاه ایمونولوژی مرکز تحقیقات دارویی کاربردی، دانشگاه علوم پزشکی تبریز، تبریز، ایران
4 گروه فارماکولوژی، دانشکده داروسازی، دانشگاه علوم پزشکی تبریز، تبریز، ایران
*نویسنده مسئول: پست الکترونیکی: Majidij@Tbzmed.ac.ir

چکیده

زمینه: هدف از این مطالعه تخلیص ساب کلاس IgG2a موش می باشد محصولی که برای ایمونیزاسیون حیوانات دیگر جهت تولید هیبریدوماها در پروسه تولید آنتی بادیهای مونو کلونال و تولید آنتی بادیهای پلی کلونال به کار می¬رود. روش کار: در قدم نخست کروماتوگرافی تعویض یونی (Ion exchange chromatography) برای تخلیص IgG موش و در مرحله بعد افینیتی کروماتوگرافی با پروتئین ProA) A) برای تخلیص ساب کلاس IgG2a موش به کار برده شد. بعد از هر مرحله تخلیص روش الکتروفورز SDS-PAGE برای تایید خالص سازی به کار رفت. در مرحله آخر تایید ساب کلاس آنتی بادی خالص شده با کمک کیت تعیین ایزوتایپ صورت گرفت. یافته ها: رسوب ایمونوگلوبولین های موشی با غلظت mg/ml 27 به مقدار 3 سی سی روی ستون افینیتی کروماتوگرافی Ion exchange برده شد. مقدار محصول IgG از ستون تعویض یونی Ion exchange) ) 28 میلی گرم و مقدار محصول IgG2a ستون ProA، 8 میلی گرم بود. در نتایج الکتروفورز SDS-PAGE در حالت احیا دو باند در موقعیت وزن مولکولی 25 و 50 کیلودالتون( KDa) مشاهده شد. تعیین ایزوتایپ محصول به دست آمده وجود IgG2a با زنجیره سبک کاپا را تایید کرد. نتیجه گیری: در این مطالعه محصول IgG2a با خلوص بالای 95% به دست آمد. خلوص بالای محصول به دست آمده نشان می¬دهد که کروماتوگرافی تعویض یونی و به دنبال آن کروماتوگرافی با ProA روش مناسبی برای تخلیص ساب کلاسهای IgG موش با کیفیت و خلوص بالا می¬باشد. تولید این محصول مناسب و اقتصادی با درجه خلوص بالا قدمی به سوی اسقلال کشور است.
نام
نام خانوادگی
پست الکترونیکی
نظرات
کد امنیتی


تعداد مشاهده چکیده: 1425

Your browser does not support the canvas element.


تعداد دانلود PDF: 254

Your browser does not support the canvas element.